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云南省鸽新城疫病毒血清学关系研究
来源:  作者:本站
摘要:利用血凝试验、血凝抑制实验和病毒中和试验对新城疫(Newcastle Disease ,ND)的不同病株(lasota 和KM-1)之间的血清学关系进行了研究。分离病毒的血凝特性能够被lasota高免血清、KM-1高免血清所抑制,且两毒株的亲缘值为71%,结果表明两者为同一血清型。在病毒中和试验中,lasota病株与KM-1毒株间抗原成分存在着差异。

关键词:鸽;新城疫病毒;血凝抑制实验;HA价;HI价;病毒中和实验

中图分类号:858.39 文献标识码:A 文章编号:1671-7236(2005)00

鸽新城疫是由禽副粘病毒引起的一种急性传染病,鸽群常突然发病,迅速蔓延,其临床症状与鸡新城疫相似,尤以嗜神经速发型为多见,发病率和死亡率很高,对养鸽业威胁很大,常能同时引起鸡新城疫的流行,七十年代末的一次全球性大流行即是首先爆发鸽新城疫,造成世界范围内鸡新城疫的大流行[1] 。我国 1986年最早发现于香港鸽场,以后国内也时有鸽新城疫的报道,随后,深圳、珠海动植物检疫局多次从进口种鸽中分离得到该病的病毒,1986年初深圳地区某鸽场爆发了该病,死亡率达24% [2] 。许多国家和地区相继分离出多种毒株,经鉴定为Ⅰ型副粘病毒(Paramyxovirus-Type 1,PMI-Ⅰ)。云南农业大学动物科学技术学院微生物实验室分离到一ND毒株(KM-1),为弄清该毒株与ND lasota毒株之间的血清学关系,对两株病毒血清学关系进行了研究。

1材料与方法

1.1材料

1.1. 1种毒:鸡ND lasota 株购自中国兽药监察所,信鸽ND KM-1株为云南昆明分离毒株,减蛋综合症( Egg Drop Syndrome ,EDS)AV-127为国际标准毒株,EDS HS-1为贵州分离毒株。

1.1. 2抗血清 鸡抗lasota、AV-127、HS-1高免血清;鸽抗lasota KM-1高免血清;免抗AV-127 HS-1高免血清均为动科院微生物室自制。

1.1.3 9日龄SPF鸡胚购自云南农大种鸡场;SPF鸽购自云南省昆明市某鸽场;SPF鸡购自云南农大鸡场;SPF兔购自云南省昆明市某兔场。

1.2 方法

1.2.1 鸡红细胞悬液:由健康来航公鸡羽根静脉采血迅速置于装有抗凝血剂(3%柠檬酸钠溶液)的离心管中,用生理盐水洗涤3次,每次以4000r/min离心10分钟,将血浆、白细胞等充分洗去,将沉淀的红细胞泥用PH=7的生理盐水稀释成1%悬浮液;8单位病毒:将含一个血凝单位的稀释度增加8倍浓度即得;4单位病毒:8单位病毒与生理盐水等量混合即得 [3] 。

1.2. 2病毒的增殖 将lasota、KM-1接种于9日龄鸡胚绒毛尿囊腔,38℃培养,每天照蛋3次,弃去24小时死亡的鸡胚,24小时以后死亡的鸡胚置于冰箱冷藏室,收集120小时鸡胚尿囊液,-20℃保存备用。

1.2.3 血凝试验(HA) 测出各种病毒的HA价,并分别配制成8单位和4单位病毒,装于疫苗瓶中冷冻备用,血凝实验用常规微量法在96孔板上进行。
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