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云南省鸽新城疫病毒血清学关系研究
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1.2.4血凝抑制实验 ND lasota毒株、ND KM-1毒株、EDS AV-127毒株、EDS HS-1毒株均能凝集鸡的红细胞,为此,取相应的抗血清分别与上述病毒作交叉血凝抑制试验,血凝抑制实验用常规微量法在96孔板上进行。

1.2.4.1不同禽病毒之间的交叉血凝抑制 用鸡新城疫(ND)两毒株(鸡ND lasota、鸽ND KM-1)与减蛋综合征(EDS)两毒株(EDS AV-127、EDS HS-1)作交叉血凝抑制。

1.2.4.2同一病毒不同毒株的交叉血凝抑制 用鸡ND lasota毒株与鸽ND KM-1毒株作交叉血凝抑制。

1.2.5病毒中和试验 参照文献[4]用固定病毒稀释血清的方法,略加改进。鸡抗NDV阳性血HI效价为2 10 ,鸽NDV HA效价为2 5 ,鸡NDV HA效价为2 10 ,用I∶1、1∶2、1∶4、1∶8、1∶16 、1∶32稀释度血清处理等量病毒液,并设生理盐水对照和血清对照、鸽源NDV对照、鸡源NDV对照。37℃感作1小时,同法接种鸡胚各3枚,孵育,收获尿囊液测HA价。采用Reed-Muench法计算50%中和终点 [5] 。

2 结果

2.1不同禽病毒的血凝试验,结果见表1

表1 不同禽病毒的血凝试验结果

毒株 HA价

ND lasota ND KM-1 AV-127 HS -1

HA价 2 10 2 5 2 8 2 9

2.2不同禽病毒的交叉血凝抑制试验 由表2可知,鸡新城疫病毒(NDV)的血凝特性能被鸡抗ND高免血清所抑制,但不能与鸡抗EDS高免血清发生交叉反应;同样两EDS毒株的血凝特性均能被其抗血清所抑制,但不能与抗ND高免血清发生交叉反应。

表2 不同禽病毒的交叉血凝抑制试验结果

毒株 HI价

鸡抗lasota 鸽抗 KM-1 鸽抗lasota 鸡抗AV -127 鸡抗HS -1

鸡ND lasota 2 10 2 8 2 9 2 0 2 0

鸽ND KM-1 2 10 2 11 2 11 2 0 2 0

EDS AV-127 2 0 2 0 2 0 2 11 2 8

EDS HS-1 2 0 2 0 2 0 2 11 2 9

2.3 不同ND毒株的交叉血凝抑制试验 由表3可知,2株不同的ND能够发生交叉血凝抑制,同一份血清对不同ND毒株的血凝抑制效价存在差异。lasota与KM-1能够发生交叉中和反应,根据两异源血清与同源血清中和滴度比值,得出关系值r1、r2(r1=Ab/Aa r2=Ba/Bb)按照公式R=100(r1×r2) 1/2 计算两毒株间的亲缘值R=71%,说明鸡lasota与鸽ND KM-1血清学关系密切属于同一血清型。

表3 不同ND毒株交叉血凝抑制试验结果

毒株 HI价

鸡抗lasota 鸽抗lasota 鸽抗KM-1

鸡ND lasota 2 10 2 9 2 8

鸽ND KM-1 2 10 2 11 2 11

2.4病毒中和试验,结果见表4

表4 病毒中和试验结果

血清稀释度 鸡[胚死亡时间(死亡率) 尿囊液HA价 胚病变数

1∶ 1 健活(0/3) 2 0 0/3

1∶2 60∽72(1/3) 2 0 0/3

1∶4 48∽84(3/2) 2 0 1/3

1∶8 48∽72(2/3) 2 3∽4 2/3

1∶16 36∽72(3/3) 2 3∽5 3/3

1∶32 36∽72(3/3) 2 5∽7 3/3

血清与生理盐水 健活(0/3) 2 0 0/3

serum or P.S. health

鸽源NDV对照 96(3/3) 2 8∽10 3/3
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